河北大学学报(自然科学版) ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (4): 387-392.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2012.04.010

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大鼠Fcε3-4基因克隆及原核表达

张艳芬1,时海浪2,王培莹2,乔晓强2,刘中成2   

  1. 1.河北大学实验室管理办公室,河北保定,071002; 2.河北大学药学院,河北保定,071002
  • 出版日期:2012-07-25 发布日期:2012-07-25
  • 基金资助:
    河北省自然科学基金资助项目,河北省科学技术研究与发展计划项目,河北大学大学生科技创新项目

Cloning and prokaryotic expression of rat Fcε3-4 gene

ZHANG Yan-fen1,SHI Hai-lang2,WANG Pei-ying2,QIAO Xiao-qiang2,LIU Zhong-cheng2   

  • Online:2012-07-25 Published:2012-07-25

摘要: 为了获得重组Fcε3-4蛋白,从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因,构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4,并转化大肠杆菌进行诱导表达,Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在.经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化,并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性.经Western Blotting和ELISA鉴定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性,能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别,为下一步研究该蛋白奠定了基础.

关键词: 大鼠, Fcε3-4基因, 克隆, 表达, 免疫特异性

中图分类号: