河北大学学报(自然科学版) ›› 2007, Vol. 27 ›› Issue (1): 83-87.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2007.01.022
李代宗,倪志华,赵晓瑜
LI Dai-zong,NI Zhi-hua,ZHAO Xiao-yu
摘要： 重组组织因子(recombinant tissue factor,rTF)是新一代凝血酶原时间检测(PT)试剂的主要成分.从新鲜兔脑组织提取总RNA,通过RT-PCR得到TF全长编码基因,并克隆到pMD19-T载体.以测序验证正确的重组子为模板,扩增TF基因并构建成融合表达质粒pMAL-c2X-TF,并将其转化到DH5α中.SDS-PAGE和Western blotting证明,菌体诱导后形成可溶性的融合表达产物,该融合蛋白通过亲和层析纯化和凝血因子X a水解成为游离的TF蛋白,该蛋白通过脂化,制备成重组PT试剂.凝血试验表明,该试剂对血浆有明显的促凝活性.
中图分类号:
