香花槐各组织总RNA提取方法的改良和优化

  • 昌艳萍 ,
  • 王晓茹 ,
  • 王宇 ,
  • 张子达 ,
  • 王华芳
展开
  • 1.北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083;河北大学生命科学学院,河北保定071002; 2.河北大学生命科学学院,河北保定,071002; 3.北京林业大学生物科学与技术学院,北京,100083

网络出版日期: 2012-01-25

基金资助

国家林业公益性行业科研专项项目

Efficient improved methods for isolation of high quality total RNA from different tissues of Robinia pseudoacacia ‘Idaho’

  • CHANG Yan-ping ,
  • WANG Xiao-ru ,
  • WANG Yu ,
  • ZHANG Zi-da ,
  • WANG Hua-fang
Expand

Online published: 2012-01-25

摘要

为探索香花槐各组织总RNA提取的最佳方法,以实验苗圃中的香花槐为实验材料,在比较了Trizol试剂法和常规CTAB法的基础上,建立了香花槐不同组织的最适提取方法.改良CTAB法利用高质量浓度的β-巯基乙醇和合适质量浓度的聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后增加苯酚/氯仿抽提次数来去除香花槐叶片和茎皮过多蛋白质.改良Trizol试剂法在根皮中加PVP研磨成白色粉末,可以有效地防止反应液褐化.各组织优化方法经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮,无降解;其A260nm/A280nm值为2.0,表明提取的总RNA质量较好.

关键词: 香花槐; 多糖; 多酚; 总RNA; 组织

本文引用格式

昌艳萍 , 王晓茹 , 王宇 , 张子达 , 王华芳 . 香花槐各组织总RNA提取方法的改良和优化[J]. 河北大学学报(自然科学版), 2012 , 32(1) : 75 -80 . DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2012.01.015

参考文献

[1] 刘昀, 李凤霞, 郑易之, 郝东时, 高天舜, 朱冬梅, 何孟元. 香花槐组培苗快繁体系的建立及工厂化育苗的主要影响因素 [J]. 应用与环境生物学报 2004.doi:10.3321/j.issn:1006-687X.2004.02.007
[2] 李宏, 王新力, Li Hong, Wang Xinli. 植物组织RNA提取的难点及对策 [J]. 生物技术通报 1999.doi:10.3969/j.issn.1002-5464.1999.01.008
[3] 徐进, 李帅, 施季森, XU Jin, LI Shuai, SHI Ji-sen. 鹅掌楸属植物总RNA提取方法的比较与分析 [J]. 福建林学院学报 2008.doi:10.3969/j.issn.1001-389X.2008.02.013
[4] 梁山. 高产速生优质木本饲料——香花槐 [J]. 新疆农业科技 2002.doi:10.3969/j.issn.1007-3574.2002.06.041
[5] JUNFAR.香花槐 [EB/OL]. http://www.landscape66com/plant/ahiwu/2005103526.html 2006.
[6] FANG G H S G R. A quick and inexpensive method for removing polysaccharides from plant genomic DNA [J]. Biotechniques 1992, 13.
[7] SCHNEIDERBAUER A, SANDERMANN H Jr, ERNST D. Isolation of functional RNA from plant tissues rich in phenolic compounds [J]. Analytical Biochemistry 1991.
文章导航

/

〈 〉