从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)匀浆液中提取出粗酶液,利用DNS法分析粗酶液中内切型纤维素酶(也称Cx酶)的活力.用刚果红染色法确定了赤子爱胜蚓含有3种内切型纤维素酶,将其分别称作Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ和Cx酶Ⅲ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析分离内切型纤维素酶,得到0.15～0.20 mol/L NaCl洗脱峰含有活性组分.以制备电泳得到了Cx酶Ⅰ和Cx酶Ⅱ,并用SDS-PAGE测定它们的分子质量分别为33 400 u和28 800 u.用DNS法测得在粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0.
[1] 宋玉芳, 周启星, 许华夏, 任丽萍, 孙铁珩, 龚平. 土壤重金属污染对蚯蚓的急性毒性效应研究 [J]. 应用生态学报 2002.
[2] 张平平, 刘宪华. 纤维素生物降解的研究现状与进展 [J]. 天津农学院学报 2004.doi:10.3969/j.issn.1008-5394.2004.03.012
[3] 熊安琪, 张玉, 张治国. 赤子爱胜蚓纤维素酶的研究 [J]. 畜牧与兽医 2007.doi:10.3969/j.issn.0529-5130.2007.10.017
[4] Shi Y.J., Shi Y., Wang X., Lu Y.L., Yan S.F.. Comparative effects of lindane and deltamethrin on mortality, growth, and cellulase activity in earthworms (Eisenia fetida) [J]. Pesticide Biochemistry and Physiology 2007, 1(1).
[5] M.L.Rabinovich, M.S.Melnick, A.V.Bolobova. The Structure and Mechanism of Action of Cellulolytic Enzymes [J]. Biochemistry 2002, 8(8).
[6] 张琰. 环毛蚓内切纤维素酶的分离纯化及酶学性质研究 [D]. 暨南大学生命科学技术学院 2007.
[7] 李建武, 萧能庚, 余瑞元. 生物化学实验原理和方法 [M]. 北京:北京大学出版社 1994.
[8] 刘宪华, 鲁逸人. 环境生物化学实验教程 [M]. 北京:科学出版社 2006.
[9] 严民宏, 王二力, 周元聪. 赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究 [J]. 华东理工大学学报(自然科学版) 1991.
[10] 杨建雄. 环毛蚓纤维素酶Cx的初步研究 [J]. 陕西师范大学学报(自然科学版) 1998, 26(02).
[11] BEGUIU P. Detection of cellulase activity in polyacrylamide gels using Congo red-stained agar replicas [J]. Analytical Biochemistry 1983, 131(02).
[12] Krishna SH., Babu JS., Reddy DS., Rao KCS.. Studies on the production and application of cellulase from Trichoderma reesei QM-9414 [J]. Bioprocess Engineering 2000, 5(5).
[13] XU B Z, HELLMAN U, ERSSON B. Purification, characterization and amino-acid sequence analysis of a thermostable, low molecular mass endo-β-1, 4-glucanase from blue mussel, Mytilus edulis [J]. European Journal of Biochemistry 2000, 267(16).
