为进一步利用基因工程手段调控甘草黄酮的合成,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从胀果甘草愈伤组织中克隆查尔酮合成酶(chalcone synthase, CHS)基因的cDNA,运用DNAMAN 软件对序列进行分析,运用PHYLIP 3.67 软件绘制系统进化树.克隆得到的基因片段全长为1 170 bp,包含1个完整的开放阅读框架(ORF),编码1个由 389个氨基酸残基组成的多肽.该基因片段与紫花苜蓿、大豆、豌豆等几种豆科植物的 CHS 核苷酸同源率高达 80% 以上,氨基酸同源率高达 90% 以上.表明克隆得到了胀果甘草chs基因cDNA,序列提交GenBank注册,序列号为 EU706287.
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