胆红素氧化酶能够特异地将胆红素氧化成胆绿素,利用酶与底物的这种特殊关系可以在凝胶上进行底物染色来直接显示酶的活性区带,这种方法称为胆红素氧化酶的活性染色法.这种活性染色可以采用胆红素直接溶入分离胶后电泳(胆红素-PAGE),也可以在电泳后置于胆红素溶液中染色(PACE-胆红素).其中PAGE-胆红素方法在20 min后即在凝胶上出现深绿色的胆红素氧化酶条带,随着时间延长,凝胶上的绿色酶条带逐渐扩散,最终形成透明条带;而运用胆红素-PAGE的方法则在12 h后才能在凝胶上看见透明的胆红素氧化酶所在的条带.相比之下,前者更为简便、快速、灵敏.
[1] 周昊, 杜林方, 朱晓峰. 用于植物光系统Ⅱ蛋白酶检测的活性染色方法 [J]. 生物化学与生物物理进展 2002.doi:10.3321/j.issn:1000-3282.2002.04.031
[2] 廖海, 杜林方, 张年辉. 一种快速检测蛋白酶抑制剂电泳活性的染色方法 [J]. 植物生理学通讯 2002.
[3] 柳军, 张陆勇. 胆红素及其类似物的结构与生物活性研究进展 [J]. 实用肝脏病杂志 2005.doi:10.3969/j.issn.1672-5069.2005.05.033
[4] 亓珊, 苏悌之. 一种α-半乳糖苷酶的凝胶电泳活性染色方法 [J]. 微生物学通报 1995, 22(04).
[5] TANAKA N, MURAO S. Reaction of bilirubin oxidase produced by Myrothecium verrucaria MT-1 [J]. Agricultural and Biological Chemistry 1985, 49.
[6] 汪国政, 范明. 蛋白质技术手册 [M]. 北京:科学出版社 2000.
[7] 胡军, 杨军艳, 张继宏. 胆红素氧化酶产生菌的选育及发酵工艺条件的研究 [J]. 食品与发酵工业 1997, 23(02).
[8] 张龙翔, 张庭芳, 李令媛. 生化实验方法和技术 [M]. 北京:高等教育出版社 1997.
[9] MCDONAGH A F, ASSISI F. The ready isomerization of bilirubin in aqueous solution [J]. Biochemical Journal 1972, 129.
[10] NORIAKI TANAKA, SAWAO MURAO. Purification and Some Properties of Bilirubin Oxidase of Myrothecium verrucaria MT-1 [J]. Agricultural and Biological Chemistry 1982, 46(10).