对蜡状芽孢杆菌Bc-05茵株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH=8.0,在pH=8.0条件下25℃和37℃放置24 h酶活力仍保持77.52%和78.96%,该酶体外对兔血凝块有明显的溶解作用;Ca2+,Mn2+离子对该酶具有激活作用,而Cu2+,Fe3+完全抑制其纤溶活性,PMSF,EDTA和DTT对该酶有抑制作用,说明活性中心含有二硫键、金属离子和丝氨酸;测其N端10个氨基酸序列为NH2-Val-Thr-Pro-Thr-Asn-Ala-Val-Asn-Thr-Gly,与其他生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.
[1] 费尚芬, 张萍萍, 李宝库, 张晓妍, FEI Shang-fen, ZHANG Ping-ping, LI Bao-ku, ZHANG Xiao-yan. 产纤溶酶菌株的发酵条件优化 [J]. 河北大学学报（自然科学版） 2006.doi:10.3969/j.issn.1000-1565.2006.03.017
[2] 赵晓瑜, 张冬, 李亚东, ZHAO Xiao-yu, ZHANG Dong, LI Ya-dong. 蚯蚓纤溶酶7#组分基因在甲醇酵母中的克隆与表达 [J]. 河北大学学报（自然科学版） 2005.doi:10.3969/j.issn.1000-1565.2005.06.016
[3] 赵晓瑜, 静天玉, 王彦芳, 王会文, 李亚东. 蚯蚓纤溶酶在大肠杆菌中的克隆与表达 [J]. 河北大学学报(自然科学版) 2002.doi:10.3969/j.issn.1000-1565.2002.04.022
[4] 凌洪博, 郑喜群, 连桂香, 国晓玲, 江洁. 脉孢菌纤溶酶的纯化和性质初步研究 [J]. 齐齐哈尔大学学报(自然科学版) 2002.doi:10.3969/j.issn.1007-984X.2002.04.002
[5] 刘晨光, 魏香, 刘万顺. 海洋假单胞菌纤溶酶的酶学性质的研究 [J]. 青岛海洋大学学报(自然科学版) 2001.doi:10.3969/j.issn.1672-5174.2001.05.014
[6] 郭利美, 王腾飞, 国天庆, 李春磊, 胡敏, GUO Li-mei, WANG Teng-fei, GUO Tian-qing, LI Chun-lei, HU Min. 根霉12#发酵生产纤溶酶的分离纯化 [J]. 山东轻工业学院学报（自然科学版） 2006.doi:10.3969/j.issn.1004-4280.2006.03.019
[7] 赵红, 程洁, 陆俭, 孟筱琦. 产芽孢梭菌纤溶酶的纯化及特性 [J]. 中国生物制品学杂志 2002.doi:10.3969/j.issn.1004-5503.2002.01.008
[8] 张自强, 张云开, 陈桂光, 梁智群, ZHANG Zi-qiang, ZHANG Yun-kai, CHEN Gui-guang, LIANG Zhi-qun. 豆豉纤溶酶高产菌株的筛选研究 [J]. 工业微生物 2007.doi:10.3969/j.issn.1001-6678.2007.01.014
[9] 王萍, 陈钧, 陈红斌, WANG Ping, CHEN Jun, CHEN Hong-bin. 纳豆激酶分离纯化及体外溶栓和溶血作用研究 [J]. 中国药学杂志 2005.doi:10.3321/j.issn:1001-2494.2005.21.022
[10] 费尚芬, 李宝库, 马玻. 高活性纤溶酶产生菌的筛选方法及酶活性的初步测定 [J]. 河北大学学报(自然科学版) 2005, 25(zk).
[11] 静天玉, 王会文, 赵晓瑜. 磁性蚯蚓纤溶酶脂质体的制备 [J]. 1999.
[12] MIHARA H, SUMI H, AKAZAWA T. Fibrinolytic enzyme extracted from the earthworm [J]. Thrombosis and Haemostasis 1983, 50.
[13] SIMI H, HAMADA H, TSUSHIMA H. A novel fibrinolytic enzyme (noottokinase) in the vegetable cheese natto, a typical and popular soybean food in the Japanese diet [J]. Experientia 1987, 43.
[14] 裴光源, 王中枢. 蒲黄纤溶酶的分离纯化及部分性质的研究 [J]. 生物化学与生物物理学报(英文版) 1991, 23(01).
[15] FUJITA M, NOMURA K, HONG K. Purification and characterization of a strong fibrinolytic enzyme (Nattokinase) in the vegetable cheese natto, a popular soybean fermented food in Japan [J]. Biochemical and Biophysical Research Communications 1993, 197(03).
[16] 王骏, 王敏, 王以光. 链霉菌产生的新型纤溶酶的纯化和性质的研究 [J]. 生物工程学报 1999, 15(02).
[17] ASTRUP T, MULLERTZ S. The fibrin plate method for estimating fibrinolytie activity [J]. Archives of Biochemistry and Biophysics 1952, 40.
