透析法和稀释法复性重组人Cu,Zn-SOD包含体

  • 刘建荣 ,
  • 赵晓瑜 ,
  • 王之宇 ,
  • 刘建国 ,
  • 静天玉
展开
  • 河北大学,生命科学学院,河北,保定,071002

网络出版日期: 2006-07-25

Renaturation of Recombinant Human Cu,Zn-Superoxide Dismutase by Dilution and Dialysis

  • LIU Jian-rong ,
  • ZHAO Xiao-yu ,
  • WANG Zhi-yu ,
  • LIU Jian-guo ,
  • JING Tian-yu
Expand

Online published: 2006-07-25

摘要

以稀释法和透析法对在E.coli中以包含体形式表达的重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)进行复性.以8 mol/L尿素溶解分离纯化的包含体(纯度达80%以上),对其稀释或透析至尿素终浓度为1.0 mol/L后,在稀释样品中补加终浓度50 μmoL/L的Cu2+和5.0 μmoL/L的Zn2+,在透析样品中补加终浓度5.0 μmoL/L的Cu2+和0.5 μmoL/L 的Zn2+,分别获得了比活3 300 u/mg和4 300 u/mg的复性rhSOD.该复性样品经铜螯合亲和层析柱纯化可获得更高比活性的rhSOD.

本文引用格式

刘建荣 , 赵晓瑜 , 王之宇 , 刘建国 , 静天玉 . 透析法和稀释法复性重组人Cu,Zn-SOD包含体[J]. 河北大学学报(自然科学版), 2006 , 26(4) : 411 -414,419 . DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2006.04.018

参考文献

[1] 张翊, 王军志, 吴勇杰, ZHANG Yi, WANG Jun-Zhi, WU Yong-Jie. 重组人超氧化物歧化酶的基因克隆、表达及产物纯化研究 [J]. 生物工程学报 2000.doi:10.3321/j.issn:1000-3061.2000.05.004
[2] 张弘浩, 赵晓瑜, 静天玉. 重组人超氧化物歧化酶的复性 [J]. 中国生化药物杂志 2003.doi:10.3969/j.issn.1005-1678.2003.01.011
[3] 施惠娟, 范立强, 陈长华. 人铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆、表达、发酵及纯化工艺研究 [J]. 中国药学杂志 1999.doi:10.3321/j.issn:1001-2494.1999.05.021
[4] 袁勤生. SOD在医药、食品和日化工业上的应用 [J]. 中国生化药物杂志 1994, 15(04).
[5] 静天玉, 赵晓瑜. 用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法 [J]. 生物化学与生物物理进展 1995, 22(01).
[6] HARTMAN J R, GELLER T, YAVIN Z. High-level expression of enzymatically active human Cu/Zn superoxide dismutase in Escherichia coli [J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 1986, 83.
文章导航

/

〈 〉