河北大学学报(自然科学版) ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (3): 275-280.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2012.03.011

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SLC38A3抗体的制备及细胞内定位

吴琛,郭亚伟,王媛媛,田焕娜,刘晓波   

  1. 河北大学生命科学学院,河北保定,071002
  • 出版日期:2012-05-25 发布日期:2012-05-25
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目,河北省自然科学基金资助项目,河北省教育厅科学研究计划项目

Preparation of rabbit antibody against SLC38A3 and its subcellular localization in A549

WU Chen,GUO Ya-wei,WANG Yuan-yuan,TIAN Huan-na,LIU Xiao-bo   

  • Online:2012-05-25 Published:2012-05-25

摘要: 从人胎肝cDNA文库中钧取得到SLC38A3全长cDNA序列.利用生物信息学方法对SLC38A3蛋白序列进行分析,根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择一段多肽序列作为抗原用于抗体制备.将该片段克隆到pET-DsbA融合蛋白表达载体上,在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下产生SLC38A3抗原肽.纯化目的蛋白并制备兔抗SLC38A3蛋白的多克隆抗体.利用Western blot鉴定抗体特异性,并初步分析该蛋白在人肺癌细胞A549内的定位.结果显示,成功构建了SLC38A3片段的原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,制备了特异性较高的人SLC38A3蛋白多克隆抗体,并证实该蛋白表达于细胞质内.为进一步研究SLC38A3的生物学功能奠定了基础.

关键词: SLC38A3, 多克隆抗体, 基因定位

中图分类号: