河北大学学报(自然科学版) ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (1): 75-80.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2012.01.015

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香花槐各组织总RNA提取方法的改良和优化

昌艳萍1,王晓茹2,王宇2,张子达2,王华芳3   

  1. 1.北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083;河北大学生命科学学院,河北保定071002; 2.河北大学生命科学学院,河北保定,071002; 3.北京林业大学生物科学与技术学院,北京,100083
  • 出版日期:2012-01-25 发布日期:2012-01-25
  • 基金资助:
    国家林业公益性行业科研专项项目

Efficient improved methods for isolation of high quality total RNA from different tissues of Robinia pseudoacacia ‘Idaho’

CHANG Yan-ping1,WANG Xiao-ru2,WANG Yu2,ZHANG Zi-da2,WANG Hua-fang3   

  • Online:2012-01-25 Published:2012-01-25

摘要: 为探索香花槐各组织总RNA提取的最佳方法,以实验苗圃中的香花槐为实验材料,在比较了Trizol试剂法和常规CTAB法的基础上,建立了香花槐不同组织的最适提取方法.改良CTAB法利用高质量浓度的β-巯基乙醇和合适质量浓度的聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后增加苯酚/氯仿抽提次数来去除香花槐叶片和茎皮过多蛋白质.改良Trizol试剂法在根皮中加PVP研磨成白色粉末,可以有效地防止反应液褐化.各组织优化方法经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮,无降解;其A260nm/A280nm值为2.0,表明提取的总RNA质量较好.

关键词: 香花槐, 多糖, 多酚, 总RNA, 组织

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