以Triton X-100处理重组E.coli制备重组人SOD包涵体

  • 刘建荣 ,
  • 顾雅君
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  • 1.河北大学生物技术研究中心,河北保定071002;河北省生物工程技术研究中心,河北保定071002; 2.河北大学生命科学学院,河北保定,071002

网络出版日期: 2014-09-25

基金资助

河北省科技研究与发展指导计划项目,河北省教育厅科学研究计划项目

Preparation of recombinant human superoxide dismutase inclusion body from recombinant E.coli cells treated with Triton X-100

  • LIU Jianrong ,
  • GU Yajun
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Online published: 2014-09-25

摘要

为替代机械破菌法破碎重组E.coli释放重组人超氧化物歧化酶rhSOD (recombinant human SOD)包涵体蛋白,采用非离子表面活性剂Triton X-100处理重组E.coli释放并提取重组人超氧化物歧化酶包涵体.以SDS-PAGE检测破菌效果,采用透析法体外复性包涵体.结果表明:经体积分数0.5%的Triton X-100处理重组E.coli制备的包涵体纯度可达65%,复性48 h,目的蛋白比活达2 801 U/mg,纯度达90%以上.与机械破菌法相比,简单实用,成本低廉,易于放大,无需特殊破菌设备,为规模化生产提供参考.

本文引用格式

刘建荣 , 顾雅君 . 以Triton X-100处理重组E.coli制备重组人SOD包涵体[J]. 河北大学学报(自然科学版), 2014 , 34(5) : 530 -534 . DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2014.05.015

参考文献

[1] 张拓宇, 董海龙, 董晓燕, ZHANG Tuoyu, DONG Hailong, DONG Xiaoyan. 渗透剂与人工伴侣耦合辅助苹果酸脱氢酶包含体的复性 [J]. 化工学报 2008.doi:10.3321/j.issn:0438-1157.2008.04.030
[2] 马明飞, 李树金, 金凤燮, 鱼红闪, MA Ming-fei, LI Shu-jin, JIN Feng-xie, YU Hong-shan. 人参皂苷葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及包涵体的变复性 [J]. 大连工业大学学报 2012.doi:10.3969/j.issn.1674-1404.2012.01.002
[3] 付元芳, 卢曾军, 曹轶梅, 郭建宏, 张小丽, 田美娜, 刘在新, 才学鹏, Yuanfang Fu, Zengjun Lu, Yimei Cao, Jianhong Guo, Xiaoli Zhang, Meina Tian, Zaixin Liu, Xuepeng Cai. 口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测 [J]. 微生物学报 2008.doi:10.3321/j.issn:0001-6209.2008.06.014
[4] 刘会宇. 玉米全覆膜双垄沟播技术创新与应用 [J]. 内蒙古农业科技 2013.doi:10.3969/j.jssn.1007-0907.2013.01.053
[5] 吴蕾, 洪建辉, 甘一如, 张瑛. 高压匀浆破碎释放重组大肠杆菌提取包含体过程的研究 [J]. 高校化学工程学报 2001.doi:10.3321/j.issn:1003-9015.2001.02.017
[6] 刘建荣, 赵晓瑜, 步得志, 李宏博, 静天玉, LIU Jian-rong, ZHAO Xiao-yu, BU De-zhi, LI Hong-bo, JING Tian-yu. 重组人超氧化物歧化酶包涵体的复性和纯化 [J]. 中国医药工业杂志 2008.doi:10.3969/j.issn.1001-8255.2008.06.007
[7] 刘建荣, 刘建国, 赵晓瑜, 顾雅君, LIU Jian-Rong, LIU Jian-Guo, ZHAO Xiao-Yu, GU Ya-Jun. 金属螯合亲和层析纯化和复性重组人铜锌超氧化物歧化酶 [J]. 生物工程学报 2005.doi:10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.025
[8] 陈宇萍, 乔媛媛, 解鹏, 何立东, 王琰, CHEN Yu-ping, QIAO Yuan-yuan, XIE Peng, HE Li-dong, WANG Yan. 抗RBC/HBsAg ds-diabody包含体复性条件的优化 [J]. 中国生物制品学杂志 2010.
[9] 修志龙, 姜炜, 苏志国. 细胞破碎技术的研究进展和发展方向 [J]. 化工进展 1994.
[10] 童海宝. 珠磨匀浆细胞破碎技术 [J]. 精细与专用化妆品 2001, 21.
[11] 静天玉, 赵晓瑜. 用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法 [J]. 生物化学与生物物理进展 1995, 22(01).
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