河北大学学报(自然科学版) ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (1): 68-74.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2012.01.014

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米曲霉(Aspergillus oryzae)沪酿3.042内切型纤维素酶的分离纯化与鉴定

武金霞1,常淑英1,孙鹏1,张永阔1,张贺迎2   

  1. 1.河北大学生命科学学院,河北保定,071002; 2.河北大学生物技术研究中心,河北保定,071002
  • 出版日期:2012-01-25 发布日期:2012-01-25
  • 基金资助:
    河北大学博士基金

Purification and identification of endocellulases from Aspergillus oryzae Huniang 3.042

WU Jin-xia1,CHANG Shu-ying1,SUN Peng1,ZHANG Yong-kuo1,ZHANG He-ying2   

  • Online:2012-01-25 Published:2012-01-25

摘要: 为了解米曲霉纤维素酶在物料分解过程中的作用,从米曲霉沪酿3.042成曲中提取粗酶液,利用DNS法分析了粗酶液中外切酶、内切酶及β-葡萄糖苷酶的活力.用刚果红染色法确定了沪酿3.042成曲粗酶液中含有4种内切型纤维素酶,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析,0.15,0.20,0.25,0.30 mol/L NaCl洗脱峰均测得内切型纤维素酶活性,制备电泳纯化得到4个内切型纤维素酶组分,SDS-PAGE结果显示,Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ为单体酶,分子质量分别为31 800,34 000,26 000 u,Cx酶jV含有4个亚基,分子质量分别为14 000,23 600,26 000,33 500 u.粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4.0.

关键词: 米曲霉, 内切型纤维素酶, 刚果红染色, 离子交换层析, 制备电泳

中图分类号: