河北大学学报(自然科学版) ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (4): 401-407.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2013.04.012

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牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D体外抗肿瘤活性及作用机制

王蓓1,戎瑞雪1,郑聪毅1,曹志然1,罗都强2   

  1. 1.河北大学基础医学院,河北保定,071000; 2.河北大学生命科学学院,河北保定,071002
  • 出版日期:2013-07-25 发布日期:2013-07-25
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目

Anti-tumor activity and the mechanism of 2-hydroxyyunnandaphnine D from Daphniphyllum calycinum in vitro

WANG Bei1,RONG Ruixue1,ZHENG Congyi1,CAO Zhiran1,LUO Duqiang2   

  • Online:2013-07-25 Published:2013-07-25

摘要: 为了研究牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D体外抗肿瘤活性及作用机制,用MTT法检测6.25~100 mg/L 2-hydroxyyunnandaphnine D分别作用于人肝癌细胞(HepG-2)、人乳腺癌细胞(MCF-7)及人宫颈癌细胞(HeLa)后不同时间点的细胞存活并计算细胞增殖抑制率和IC50;FDA/PI双染色荧光显微镜观察细胞死亡情况;分光光度法检测Caspase-3酶活性变化;MTT法检测凋亡抑制剂Z-VAD-FMK对2-hydroxyyunnandaphnine D抑瘤活性的影响.结果显示:2-hydroxyyunnandaphnine D对3种瘤株均有明显的抑制作用,且具有明显的时效量效关系,其48 h的IC50值分别为(1.30±0.09),(7.32士0.10)和(8.41士0.11)mg/L.FDA/PI双染色荧光显微镜观察显示2-hydroxyyunnandaphnine D组中死亡细胞数较正常对照组细胞死亡数量增加,且随着剂量的加大细胞死亡数量增加.MTT法显示凋亡抑制剂Z-VAD-FMK不能阻断2个浓度的2-hydroxyyunnandaphnine D对HepG-2细胞的增殖抑制作用.Caspase-3酶活性测定显示10,30 mg/L 2-hydroxyyunnandaphnine D作用后肿瘤细胞的Caspase-3酶活力单位与正常对照组比较无统计学意义.结果表明:牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D在体外具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用机制并非通过激活Caspase-3途径.

关键词: 牛耳枫, 2-hydroxyyunnandaphnine D, MTT, Z-VAD-FMK, Caspase-3

Key words: Daphniphyllum calycinum, 2-hydroxyyunnandaphnine D, MTT, Z-VAD-FMK, Caspase-3

中图分类号: