河北大学学报(自然科学版) ›› 2014, Vol. 34 ›› Issue (5): 497-501.DOI: 10.3969/j.issn.1000-1565.2014.05.010

• • 上一篇    下一篇

基于8-氨基1,3,6-萘三磺酸二钠盐的糖基化蛋白质标记方法

秦新英1,李瑞2   

  1. 1.河北大学化学与环境科学学院,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002; 2.固废资源化利用与节能建材国家重点实验室,北京,100041
  • 出版日期:2014-09-25 发布日期:2014-09-25
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目,河北省自然科学基金资助项目,河北省教育厅科学技术研究发展项目

Research on 8-aminonaphthalene 1,3,6-trisulfonic acid disodium salt based fluorescent tag for selective glycoprotein labeling

QIN Xinying1,LI Rui2   

  • Online:2014-09-25 Published:2014-09-25

摘要: 发展了基于荧光试剂8-氨基1,3,6-萘三磺酸二钠盐(ANTS)的糖基化蛋白质选择性标记和荧光检测的新方法.实验中以标准蛋白质细胞色素c和核糖核酸酶b为样品,优化了pH和反应时间.在优化的条件下,核糖核酸酶b的检测灵敏度可提高22倍,而非特异性的标记仅为1%,显示了这种衍生方法极好的选择性.进一步将该方法应用于卵清蛋白的衍生,通过结合二氧化钛(TiO2)亲和富集,共鉴定到14个蛋白质,其中超过85%的蛋白质具有一致的N-X-T/S(X为除脯氨酸以外的其他氨基酸)序列,为潜在的糖基化蛋白,进一步验证了该方法的高选择性.

关键词: 8-氨基1, 3, 6-萘三磺酸二钠盐, 糖基化蛋白质, 标记, 荧光检测

Key words: 8-aminonaphthalene-1,3,6-trisulfonic acid disodium, glycoprotein, labeling, fluorescent detection

中图分类号: